TGFBI基因调控人脐带间充质干细胞向成骨细胞的分化

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的探讨转化生长因子β诱导蛋白（TGFBI）基因调控人脐带来源间充质干细胞（huc-MSC）的成骨分化作用。方法培养huc-MSC,流式细胞术检测细胞表面标志物CD14、CD34、CD45、CD73、CD90、CD105,油红O染色和碱性磷酸酶（ALP）染色检测体外成脂肪细胞和成骨细胞的诱导分化能力,实时荧光定量PCR（q-PCR）检测成脂和成骨关键转录因子的表达。采用si-RNA瞬时转染技术敲低huc-MSC的TGFBI基因,并研究其对huc-MSC生物学特性的影响;进一步利用慢病毒载体构建稳定敲低TGFBI基因的huc-MSC(TGFBI-/-huc-MSC),并对TGFBI-/--hucMSC进行成骨细胞诱导分化,ALP染色鉴定细胞ALP活性,q-PCR检测成骨分化关键转录因子ALP及骨桥蛋白（OPN）的表达差异。结果培养的huc-MSC表达MSC表面标志物CD14-CD34-CD45-CD73+CD90+CD105+,TGFBI基因敲低后不影响huc-MSC表面标志物的表达;成脂肪诱导分化后,出现大量红色脂滴,成脂分化关键转录因子Adi和过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）表达显著增加（P<0.001）;成骨诱导分化后,ALP活性增加,成骨分化关键转录因子OPN和ALP表达亦显著增加（P<0.001）,证明敲低TGFBI基因的huc-MSC仍具有向成脂、成骨分化的特性,但其成骨诱导分化能力较未敲除组增强,其中ALP活性、ALP基因（P<0.001）及OPN基因（P<0.001）的表达均显著增高。结论 TGFBI基因能抑制huc-MSC的成骨分化。

【关键词】 转化生长因子β诱导蛋白基因 间充质干细胞 成骨诱导分化

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