PM2.5通过活化p38K/Egr-1途径介导人支气管上皮细胞Beas-2B中血管内皮生长因子表达上调的分子机制

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的探讨大气细颗粒物(PM2.5)暴露后人肺(支气管)上皮Beas-2B细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达水平升高的调控机制。方法利用生物信息学软件预测人vegf启动子区的潜在转录因子结合位点。采用不同浓度PM2.5(0,12.5,25,50,100μg/ml)刺激Beas-2B细胞,Western印迹法检测VEGF表达调控相关转录因子及其上游蛋白激酶的表达或活化水平。利用相关的siRNA和化学抑制剂分别抑制各信号蛋白的表达和活化后,利用ELISA、Western印迹、RT-PCR和双荧光素报告基因分析法检测PM2.5诱导VEGF表达水平改变情况。结果发现人vegf启动子区存在转录因子早期生长应答蛋白1(Egr-1)结合位点。经不同浓度PM2.5刺激Beas-2B细胞后,可检测到Egr-1的显著诱导表达。采用特异性siRNA抑制Egr-1表达后,VEGF的转录和蛋白合成反应显著降低,分泌表达水平显著抑制。Egr-1上游蛋白激酶丝裂原活化蛋白激酶p38(p38K)活化水平随PM2.5剂量升高而增强。其特异性抑制剂SB203580预处理Beas-2B细胞后,p38K活化被抑制,Egr-1诱导表达水平显著降低,同时VEGF的转录和蛋白表达均明显受抑。结论 PM2.5可通过诱导Beas-2B细胞中p38K活化引发转录因子Egr-1表达进而上调VEGF的分泌表达水平。

【关键词】 细颗粒物 支气管上皮细胞 血管内皮生长因子 早期生长应答蛋白1 丝裂原活化蛋白激酶p38

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